大賽璐手性柱是由具有光學(xué)活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相,通過(guò)引入手性環(huán)境使對(duì)映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達(dá)到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。
要實(shí)現(xiàn)手性識(shí)別,手性化合物分子與手性固定相之間至少存在三種相互作用。這種相互作用包括氫鍵、偶級(jí)-偶級(jí)作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結(jié)果。這些相互作用通過(guò)影響包埋復(fù)合物的形成,特殊位點(diǎn)與分析物的鍵合等而改變手性分離結(jié)果。
在手性拆分中,溫度的影響是很顯著的。低溫增加手性識(shí)別能力,但可能引起色譜峰變寬而導(dǎo)致分離變差。因此確定手性分析方法過(guò)程中要考慮柱溫的影響,確定柱溫。
手性分析很關(guān)鍵的一項(xiàng)是流動(dòng)相的選擇,手性分析一般都采用正相,使用多的流動(dòng)相是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇這四種,其中起洗脫作用的流動(dòng)相是乙醇和異丙醇,正己烷和正庚烷用來(lái)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。
正己烷和正庚烷對(duì)于樣品分離沒(méi)有什么太大的影響,不會(huì)改變選擇性和分離度,通常都可以混用,不過(guò)正庚烷比正己烷對(duì)人體的傷害要小很多,但價(jià)格是后者的一倍,所以歐美的很多大制藥公司多使用正庚烷,而國(guó)內(nèi)多使用正己烷。
流動(dòng)相里添加酸或者堿以后,基本上不會(huì)提供額外的選擇性,但是卻能提高分離度,因?yàn)榉逍魏昧耍嗤谋A魰r(shí)間兩個(gè)峰之間的分離度自然就好了。但是流動(dòng)相里添加酸或者堿以后,會(huì)在柱子上殘留,即使長(zhǎng)時(shí)間用中性流動(dòng)相沖洗也不會(huì)有什么效果,這一點(diǎn)在鍵合相手性柱上表現(xiàn)的尤為明顯。