親水C18色譜柱在用于分離疏水性化合物與常規(guī)的C18相具有相似的選擇性,所以也可以作為一種通用C18柱使用。它是專為親水性和極性化合物具有更強的保留能力和選擇性而設計的。
須注意以下事項:
1、新親水C18在使用前,須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗,作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈舒展,使色譜柱的性能達到好狀態(tài)。具體操作是,將配制好65%的乙腈/水沖洗后,把入口端連接在色譜儀上,出口端放空(不可連上檢測器,以免污染了檢測器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將柱中的清稀溶液吹干,過20分鐘后再接上檢測器,以1.0ml/min的流速,繼續(xù)沖洗2~8小時;
2、液相色譜儀檢測分析樣品完畢后,須沖洗色譜柱。尤其是流動相中含有酸或鹽時,需將柱中的酸或鹽沖洗干凈,通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積;
3、若色譜柱處于長期閑置狀態(tài)時,要將其沖洗,建議沖洗3-4小時以上,后保存在純有機試劑或高比例的有機試劑溶液(如90%甲醇水)中;
4、由于親水C18的固定相疏水性較強,在使用過程中盡量不要使用高水相條件,若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的負面影響;由于碳載量高,表現(xiàn)尤為明顯,建議使用過程中水相比例不超過90%。