大賽璐手性柱是由具有光學(xué)活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引入手性環(huán)境使對映異構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的。
確認儀器各部件狀態(tài):
校準各泵的流速看是否準確。
使用溶劑及配制:
a)使用的有機溶劑(流動相)均為色譜級。
b)配制流動相時,請充分振蕩混合均勻,并且超聲排除氣泡。
c)若在流動相中添加了帶電荷的添加劑(例如:DMOA:N,N-Dimethyloctylamine,HFBA:Heptafluorobutyricacid,OA:Octanoicacid),則這根大賽璐手性柱以后的實驗中也應(yīng)該一直使用帶電荷的添加劑,否則實驗數(shù)據(jù)可能不準確。
樣品的配制:
a)通常使用純水溶解樣品,或者85%以上的水和15%以內(nèi)的有機相(有機相為甲醇,乙醇,異丙醇和乙腈,和流動相中的有機相成分相同)的混合溶劑。一般不能使用100%的甲醇,乙醇,異丙醇和乙腈溶解樣品。若溶解樣品的溶劑與流動相組分差別過大,需要特別注意會出現(xiàn)樣品結(jié)晶析出的可能,一般表現(xiàn)為柱壓升高,峰型不正常等現(xiàn)象。
b)請在配樣前確認樣品里有沒有殘留對大賽璐手性柱有損傷性的有機溶劑或其他雜質(zhì)(如:與蛋白質(zhì)有強吸附作用力的化學(xué)物質(zhì))。
c)樣品溶解后,需要用有機相過濾膜(通常為0.45µm)過濾。