手性柱通過手性固定相與手性化合物分子之間的相互作用實現(xiàn)手性識別。這種相互作用包括氫鍵、偶極-偶極作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用等多種類型。這些作用力雖然微弱,但通過影響包埋復合物的形成和特殊位點與分析物的鍵合,共同作用于手性分離效果。
手性柱的使用注意事項:
流動相的選擇:流動相中不能含有無機酸、無機堿,也不能使用不含銅離子的鹽,以防止損壞設備。同時,流動相必須采用預混合方式走等度,避免在線混合方式。
pH值的控制:手性柱的使用應避免在pH低于4.0或高于7.0的條件下進行,最佳pH范圍為4.0~7.0。強堿性溶液的導入尤其容易導致手性柱不可逆損壞。
流速與柱壓:流速一般不大于0.8ml/min,柱壓應控制在50bar~100bar之間,以防超過色譜柱使用壓力上限。
柱的預處理與保養(yǎng):新柱使用前需用合適的溶劑沖洗流路,并在使用過程中注意定期沖洗和保養(yǎng),以延長柱的使用壽命。
樣品的溶解:樣品必須用水或流動相溶解,避免使用可能破壞手性固定相的溶劑。