c18色譜柱的柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長,實驗室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子,一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應用,—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質的復雜樣品程序升溫分析。
c18色譜柱的柱效率與柱半徑平方成反比,內徑越小柱效越高,但內徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時,則因柱內每塊理論板內不能建立平衡,將會導致色譜蜂畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。
因此對于復雜樣品需要準確分離,要使用小內徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就要使用內徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內徑一般是4.6mm。
如何更換色譜柱,液相色譜柱怎么換:
1、首先把原來儀器上的柱子用甲醇或其他有溶劑沖下干凈后,沖去柱子中殘留的緩沖鹽和之前難以洗脫的組分。
2、然后把柱子兩邊的PEAK頭擰下來,用配套的塞子將換下的柱子兩頭堵上。
3、換上新的色譜柱時,應先將需換上的柱子兩邊的塞子旋開,確定好柱子標示的方向后,先接柱子入口端,并使柱子出口端略高于入口端,這樣就使流動相流過柱子時能將其中的氣泡排出,待氣泡排盡后,再接上柱子的出口端。
4、注意拆柱子時要關流速,后接柱子時要開流速。