寬PH色譜柱具有很好溶劑耐受性,所有適用于HPLC的溶劑均可作為流動(dòng)相或者樣品溶媒使用。因此它可以用于各種分析條件,不必?fù)?dān)心因溶劑使用不當(dāng)而造成的劣化或者損壞。同時(shí)也進(jìn)一步擴(kuò)大了分離條件的選擇范圍,能夠分離更多的手性化合物。
1.提高柱效的方法
要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。
(1)降低移動(dòng)相的流速,但會(huì)使分析時(shí)間延長(zhǎng)。
(2)減少固定相的量,但寬PH色譜柱中樣品的負(fù)載量也隨之減小。
(3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會(huì)減小。
(4)選用低粘度的移動(dòng)相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。
(5)適當(dāng)提高柱溫,可降低移動(dòng)相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
(6)盡量減小停滯移動(dòng)相的體積,但卻加快了移動(dòng)相的流速。
從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過對(duì)柱效值的跟蹤測(cè)算,對(duì)自己分析方法不斷的研究和實(shí)踐,才能找到工作條件。
2、對(duì)柱效值進(jìn)行跟蹤測(cè)算應(yīng)注意的問題
我們也應(yīng)記住柱效值并不足以預(yù)測(cè)在所有條件下的柱性能,對(duì)大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是寬PH色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。
不管用什么特定的測(cè)試方法,都會(huì)有幾個(gè)參數(shù)影響柱效的測(cè)定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測(cè)定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長(zhǎng),填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測(cè)量和計(jì)算方法。而測(cè)量和計(jì)算方法對(duì)柱效值的確定起著大的作用。