凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù),是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。
什么是凝膠色譜法
凝膠色譜法又叫凝膠色譜技術(shù),是六十年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離分析技術(shù),由于設(shè)備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質(zhì)有很高的分離效果。凝膠色譜法又稱分子排阻色譜法。凝膠色譜法主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對分子質(zhì)量分布測試。根據(jù)分離的對象是水溶性的化合物還是有機溶劑可溶物,又可分為凝膠過濾色譜(GFC)和凝膠滲透色譜(GPC)。GFC一般用于分離水溶性的大分子,如多糖類化合物。凝膠的代表是葡萄糖系列,洗脫溶劑主要是水。凝膠滲透色譜法主要用于有機溶劑中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相對分子質(zhì)量分布分析及分離,常用的凝膠為交聯(lián)聚苯乙烯凝膠,洗脫溶劑為四氫呋喃等有機溶劑。凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質(zhì)量和相對分子質(zhì)量分布,同時根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離油溶性和水溶 性物質(zhì),分離相對分子質(zhì)量的范圍從幾百萬到100以下。近年來,凝膠色譜也廣泛用于分離小分子化合物?;瘜W(xué)結(jié)構(gòu)不同但相對分子質(zhì)量相近的物質(zhì),不可能通過凝膠色譜法達(dá)到*的分離純化的目的。凝膠色譜主要用于高聚物的相對分子質(zhì)量分級分析以及相對勿子質(zhì)量分布測試。目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛采用,不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。
凝膠色譜法的原理
凝膠色譜是根據(jù)多孔凝膠對不同大小分子的排助效應(yīng)進(jìn)行分離。
樣品在多孔凝膠柱中隨著流動相的移動,待分離的組分沿凝膠顆粒間的孔隙移動,大分子移動路徑較短,先流出色譜柱,小分子由于擴散進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,遷移路徑長,后流出色譜柱,實現(xiàn)分離。